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All-in-One RT Mix with DNase

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
M10101 20 µL×20 T ¥428.00 98
M10101 20 µL×100 T ¥1126.00 98
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效能等同TAKARA PrimeScript™ RT Master Mix(Perfect Real Time)
本文中PrimeScript™为TAKARA的商标及注册商标

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实验操作小课堂

  • 问：逆转录产物无条带或条带很弱是什么原因？
  • 答：可能是RNA模板质量不佳，存在降解或纯度不够；引物设计不合理，无法有效结合模板；逆转录酶活性降低或失活；反应体系中某些成分添加错误或量不足。可通过重新提取高质量RNA、优化引物设计、更换新的逆转录酶和检查反应体系来解决。
  • 问：逆转录产物出现非特异性条带怎么办？
  • 答：可能是引物特异性差，与非目的基因序列结合；模板中存在杂质或基因组DNA污染；PCR扩增条件过于宽松。解决方法包括重新设计特异性更高的引物；对RNA模板进行DNase I处理去除基因组DNA污染；优化PCR扩增条件，如提高退火温度、减少循环次数等。

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All-in-One RT Mix with DNase
一管化 RT Mix with DNase

极简一次加样，DNase+逆转录酶，2 min去基因组，高温55 ℃ 15 min逆转录

  • 储运条件 -20℃ 保存；冰袋运输
  • 产品简介 All-in-One RT Mix with DNase是一款集基因组DNA去除与逆转录反应于一体的高效试剂盒，其核心原理依托逆转录酶催化RNA合成cDNA，搭配的热敏感DNase可在高温下不可逆失活，实现单管内完成gDNA清除与逆转录，无需额外添加EDTA失活。相较传统分步操作试剂盒，本产品简化流程、降低RNase污染与RNA模板损伤风险，且一管化体系仅需添加模板与水即可反应。生成的cDNA可直接用于qPCR，广泛适用于基因表达定量、病原体检测、转录组研究等场景，为分子生物学实验提供快速精准、稳定可靠的解决方案，助力基因功能研究与疾病标志物筛选。
  • 应用范围 逆转录、基因表达定量分析、病原体检测、转录组研究等
  • 产品特点

    极简操作：一管化Mix使用方便，仅需添加RNA模板与水，降低操作污染风险；

    极速去gDNA：37 ℃，2 min极速去除基因组DNA；

    合成速度快：特制高效热敏感DNase，反转效率高，15 min快速合成cDNA；

    cDNA产量高：逆转录温度高达55 ℃，cDNA产量更高，具有更完整的基因代表性。

  • 产品组分

    组分

    20 μL×20 T

    20 μL×100 T

    A. 5× RT All-in-One Mix

    80 µL

    2×200 µL

    B. DNase

    20 µL

    100 µL

    C. RNase-Free Water

    1.7 mL

    2×1.7 mL

    注：5× RT All-in-One Mix包含逆转录酶，RNA酶抑制剂，dNTPs，Oligo(dT)20VN和随机引物等。

    注：100 T为试剂盒进行20 μL体系反应时反应的次数。

  • 结果判读

    图1.逆转录效率测试qPCR扩增曲线图

    图2.逆转录效率测试线性关系图

    结果判读：以浓度梯度为1 pg-5 μg的总RNA模板量区间内，使用本产品进行逆转录实验，以cDNA为模板进行qPCR验证。结果证明，在模板量区间内，本产品都可以高效率地合成cDNA。

    在浓度梯度为1 pg-5 μg的总RNA模板量区间内，相关性分析E=95.8%，R²=0.9998，表明不同模板量结果间具有较好的线性关系。


  • 问：逆转录产物无条带或条带很弱是什么原因？
  • 答：可能是RNA模板质量不佳，存在降解或纯度不够；引物设计不合理，无法有效结合模板；逆转录酶活性降低或失活；反应体系中某些成分添加错误或量不足。可通过重新提取高质量RNA、优化引物设计、更换新的逆转录酶和检查反应体系来解决。
  • 问：逆转录产物出现非特异性条带怎么办？
  • 答：可能是引物特异性差，与非目的基因序列结合；模板中存在杂质或基因组DNA污染；PCR扩增条件过于宽松。解决方法包括重新设计特异性更高的引物；对RNA模板进行DNase I处理去除基因组DNA污染；优化PCR扩增条件，如提高退火温度、减少循环次数等。

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    质量   浓度   体积   分子量 *
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    质量   浓度
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    体积   分子量 *
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    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
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    浓度 (start) × 体积 (start) =
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    浓度 (final) × 体积 (final)
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