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TSA Three-Colors Multiplex Detection Kits(520/570/DAPI, with HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG)

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
P31209 20 slides ¥799.00 100
P31209 50 slides ¥1499.00 100
P31209 100 slides ¥2399.00 100
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效能等同于AKOYA Opal™ Color Manual IHC Kit
本文中Opal™为AKOYA的商标及注册商标

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实验操作小课堂

  • 问：多种一抗能否共孵育搭配酪胺放大染色？
  • 答：试剂盒适配多色荧光成像，可联用荧光标记抗体；多酪酰胺同片染色需序贯染色，每轮染色完成后洗脱抗体，避免信号交叉干扰。
  • 问：不同品牌酪胺底物命名规则有区别吗？通道该怎么选？
  • 答：本产品酪酰胺按发射波长命名，请根据成像设备荧光通道参数匹配对应底物，光谱参数详见产品参数。
  • 问：多轮多重染色时，抗体洗脱效果差怎么办？
  • 答：可重复抗体洗脱步骤提升剥离效果；配套增强型免疫染色抗体洗脱液可向我司单独订购。
  • 问：对于组织面积偏大时试剂用量怎么控制？
  • 答：组织面积较大时，可适当增加二抗、酪酰胺底物等滴加量，保证样本组织完全被覆盖。
  • 问：成像出现荧光通道串色，是什么原因？如何解决？
  • 答：串色由多重因素引发，对应优化方案如下：
    a. 成像硬件因素：设备滤光片波长带宽过宽；建议更换窄带宽专用滤光片，减少通道光谱重叠；
    b. 抗体洗脱不彻底：上一轮一抗、二抗未完全剥离，高亲和力靶标（如CK系列蛋白）更易残留；可延长抗体洗脱时长、适当提升洗脱温度，强化剥离效果；
    c. 信号强度失衡：相邻荧光通道信号亮度差距过大，强信号发生光谱外溢；调整酪胺孵育时间或一抗稀释比例，平衡各通道荧光强度；
    d. 人为操作失误：抗体混用、多轮染色后遗漏抗体洗脱/抗原修复步骤，严格规范每轮染色操作流程即可规避。
  • 问：BF™荧光酪胺底物与TSA扩增缓冲液稀释比例该如何优化？
  • 答：本试剂盒TSA信号放大灵敏度显著高于常规TSA体系，信号易过度饱和，需按需调整：
    a. 荧光信号过强、背景偏高：降低酪胺染料稀释浓度、缩短TSA孵育时间、适度提高一抗稀释倍数；
    b. 荧光信号微弱、特异性显色浅：提升酪胺染料浓度、延长孵育时长、降低一抗稀释比例；
    本底物信号随浓度呈指数级放大，1∶50稀释可获得极强荧光信号，1∶500稀释亮度等同于普通TSA试剂盒显色水平，推荐常规实验1∶200稀释使用。
  • 问：BF™荧光酪胺染料操作全程是否需要避光？
  • 答：本系列荧光底物抗光淬灭性能优异，常规室内白光操作无需避光，无需全程暗室处理；仅需避免样品、染料长时间直接暴晒于强光或太阳光下。
  • 问：多重靶标染色时，抗原指标、一抗孵育顺序如何规划？
  • 答：
    a. 难洗脱、易残留的对应一抗放在最后一轮染色，避免前序残留造成通道串色；
    b. 染色难度高、表达量极低的靶标优先在前几轮完成染色（如Foxp3核转录因子）；
    c. 修复方案参考：可选择首轮优先采用pH 9.0 EDTA水浴修复；第二轮及后续循环统一使用pH 6.0柠檬酸钠高温修复。
  • 问：切片出现非特异性荧光背景，产生原因与优化方案？
  • 答：非特异背景主要来源及对应解决办法：
    a. 一抗为多克隆抗体，天然存在非特异结合；可更换单克隆一抗，或提高一抗稀释比例、降低抗原修复强度；
    b. TSA信号放大过度；缩短酪胺底物孵育时间、降低荧光酪胺工作液浓度；
    c. 内源过氧化物酶封闭不完全；延长3% H₂O₂避光封闭孵育时间；
    d. 封闭不充分；延长封闭液孵育时长，更换含血清/BSA的高效封闭液。

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TSA Three-Colors Multiplex Detection Kits(520/570/DAPI, with HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG)
三色 TSA 多重荧光免疫组化染色试剂盒（520/570/DAPI，鼠兔通用二抗）

双标三色 超百倍信号放大 即用鼠兔通用二抗 简化TSA配液 可多轮复染

  • 储运条件 试剂盒4 ℃避光，冰袋运输；收货后各组分可按照瓶身储存条件和Exp（效期）分别保存
  • 产品简介 TSA Three-Colors Multiplex Detection Kits (520/570/DAPI, with HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG)基于酪酰胺信号放大(TSA)技术，适配石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片等样本开展三色多重荧光原位检测。试剂盒依靠HRP标记二抗催化荧光酪胺与组织酪氨酸残基形成稳定共价结合，实现超百倍信号放大；通过洗脱抗体复合物、保留锚定荧光信号，多轮染色完成单张切片3个靶标同步分析。产品克服传统荧光染色灵敏度低、同属一抗交叉干扰问题，520/570双通道荧光搭配DAPI核染料，适合微量蛋白标志物共定位检测，配套通用二抗简化实验流程，降低多重染色操作难度，助力肿瘤微环境、细胞亚型空间分布等多靶标组织学研究。
  • 应用范围 石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片/涂片、多孔板中培养的细胞等多重免疫荧光染色、核酸蛋白共定位(TSA+ISH)、低丰度蛋白原位表达检测等
  • 产品特点

    超高灵敏信号放大：依托TSA酪酰胺催化沉积技术，HRP协同过氧化氢酶促反应实现靶标信号超100倍放大，极低丰度抗原和复杂样本亦可呈现清晰特异性荧光；

    突破抗体种属限制：TSA技术几乎完美解决抗体种属选择的限制，同时配套即用型羊抗鼠/兔通用二抗，可按需直接使用；

    配液流程简化：预配制TSA缓冲液，BF™荧光酪胺仅需1∶200稀释即可配置，省去缓冲液复溶、多试剂配比换算等繁琐操作；

    自研高性能荧光底物：BF™系列荧光酪胺相较于市面同类产品，在同等稀释倍数下有效浓度更高，荧光信号更强，成像具备更优异的信噪比；

    同切片多轮复染：洗脱可清除一抗、二抗及HRP复合物，共价结合荧光信号稳定保留，更换不同波段荧光底物，单张切片完成多靶点原位共定位；

    多样本适配：兼容石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片/涂片、多孔板中培养的细胞，可配套免疫荧光(IF)、原位杂交(ISH)共定位实验。

  • 产品参数

    BF™ 520 Tyramide Ex/Em：495/519 nm

    BF™ 570 Tyramide Ex/Em：555/565 nm

    BF™ 620 Tyramide Ex/Em：590/617 nm

    BF™ 660 Tyramide Ex/Em：642/662 nm

  • 产品组分

    TSA Three-Colors Multiplex Detection Kits(520/570/DAPI, with HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG)(P31209)

    保存条件

    规格/组分

    20 slides

    50 slides

    100 slides

    P31401 Ready-to-use Tyramide Amplification Buffer(1×)

    4 mL

    10 mL

    20 mL

    (1) 试剂盒可4 ℃避光保存，组分性能满足质量标准。

    (2) 组分标签为独立长期存放的最优条件，可按各瓶身条件分别保存。

    (3) 收货后各组分可按照瓶身Exp（效期）分别保存。

    C22206 Ready-to-use DAPI

    2 mL

    5 mL

    10 mL

    C23006 Plus Diamond Antifade Reagent

    400 μL

    1 mL

    2 mL

    P30503 Ready-to-use Polymer HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG

    4 mL

    10 mL

    20 mL

    B41102 Ready-to-use BF™ 520 Tyramide(200×)

    10 μL

    25 μL

    50 μL

    B41105 Ready-to-use BF™ 570 Tyramide(200×)

    10 μL

    25 μL

    50 μL


    注：本试剂盒使用次数以石蜡切片每次使用100 μL Tyramide染色工作液计算。
  • 结果判读

    图1.TSA染色全视野图

    本图为脾脏多重TSA荧光染色石蜡切片，使用切片扫描机实测。本多重染色体系采用CD3、CD19、F4/80特异性一抗孵育，搭配二抗，分别结合BF™ 520 Tyramide、BF™ 570 Tyramide、BF™ 660 Tyramide酪酰胺底物实现多靶标荧光显色，最后使用DAPI完成细胞核复染，实现四通道同步成像。

    注：实际检测结果可能因检测仪器、操作条件、样本类型等差异产生不同，本示例仅提供参考。
  • 问：多种一抗能否共孵育搭配酪胺放大染色？
  • 答：试剂盒适配多色荧光成像，可联用荧光标记抗体；多酪酰胺同片染色需序贯染色，每轮染色完成后洗脱抗体，避免信号交叉干扰。
  • 问：不同品牌酪胺底物命名规则有区别吗？通道该怎么选？
  • 答：本产品酪酰胺按发射波长命名，请根据成像设备荧光通道参数匹配对应底物，光谱参数详见产品参数。
  • 问：多轮多重染色时，抗体洗脱效果差怎么办？
  • 答：可重复抗体洗脱步骤提升剥离效果；配套增强型免疫染色抗体洗脱液可向我司单独订购。
  • 问：对于组织面积偏大时试剂用量怎么控制？
  • 答：组织面积较大时，可适当增加二抗、酪酰胺底物等滴加量，保证样本组织完全被覆盖。
  • 问：成像出现荧光通道串色，是什么原因？如何解决？
  • 答：串色由多重因素引发，对应优化方案如下：
    a. 成像硬件因素：设备滤光片波长带宽过宽；建议更换窄带宽专用滤光片，减少通道光谱重叠；
    b. 抗体洗脱不彻底：上一轮一抗、二抗未完全剥离，高亲和力靶标（如CK系列蛋白）更易残留；可延长抗体洗脱时长、适当提升洗脱温度，强化剥离效果；
    c. 信号强度失衡：相邻荧光通道信号亮度差距过大，强信号发生光谱外溢；调整酪胺孵育时间或一抗稀释比例，平衡各通道荧光强度；
    d. 人为操作失误：抗体混用、多轮染色后遗漏抗体洗脱/抗原修复步骤，严格规范每轮染色操作流程即可规避。
  • 问：BF™荧光酪胺底物与TSA扩增缓冲液稀释比例该如何优化？
  • 答：本试剂盒TSA信号放大灵敏度显著高于常规TSA体系，信号易过度饱和，需按需调整：
    a. 荧光信号过强、背景偏高：降低酪胺染料稀释浓度、缩短TSA孵育时间、适度提高一抗稀释倍数；
    b. 荧光信号微弱、特异性显色浅：提升酪胺染料浓度、延长孵育时长、降低一抗稀释比例；
    本底物信号随浓度呈指数级放大，1∶50稀释可获得极强荧光信号，1∶500稀释亮度等同于普通TSA试剂盒显色水平，推荐常规实验1∶200稀释使用。
  • 问：BF™荧光酪胺染料操作全程是否需要避光？
  • 答：本系列荧光底物抗光淬灭性能优异，常规室内白光操作无需避光，无需全程暗室处理；仅需避免样品、染料长时间直接暴晒于强光或太阳光下。
  • 问：多重靶标染色时，抗原指标、一抗孵育顺序如何规划？
  • 答：
    a. 难洗脱、易残留的对应一抗放在最后一轮染色，避免前序残留造成通道串色；
    b. 染色难度高、表达量极低的靶标优先在前几轮完成染色（如Foxp3核转录因子）；
    c. 修复方案参考：可选择首轮优先采用pH 9.0 EDTA水浴修复；第二轮及后续循环统一使用pH 6.0柠檬酸钠高温修复。
  • 问：切片出现非特异性荧光背景，产生原因与优化方案？
  • 答：非特异背景主要来源及对应解决办法：
    a. 一抗为多克隆抗体，天然存在非特异结合；可更换单克隆一抗，或提高一抗稀释比例、降低抗原修复强度；
    b. TSA信号放大过度；缩短酪胺底物孵育时间、降低荧光酪胺工作液浓度；
    c. 内源过氧化物酶封闭不完全；延长3% H₂O₂避光封闭孵育时间；
    d. 封闭不充分；延长封闭液孵育时长，更换含血清/BSA的高效封闭液。

    • 本资料源自公开学术渠道，如需转载或引用，请联系原文作者获取授权。本页面内容仅作学术参考，不代表任何商业推荐或合作。

    TSA Four-Colors Multiplex Detection Kits(520/570/660/DAPI, with HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG)
    三标四色 超百倍信号放大 即用鼠兔通用二抗 简化TSA配液 可多轮复染
    货号 规格 目录价 库存
    P31211 20 slides 999.00元 100
    P31211 50 slides 1899.00元 100
    P31211 100 slides 3099.00元 100
    TSA Three-Colors Multiplex Detection Kits(520/620/DAPI, with HRP Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG)
    双标三色 超百倍信号放大 即用鼠兔通用二抗 简化TSA配液 可多轮复染
    货号 规格 目录价 库存
    P31210 20 slides 799.00元 100
    P31210 50 slides 1499.00元 100
    P31210 100 slides 2399.00元 100
    摩尔浓度计算器 稀释计算器 分子量计算器
    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
    = ×
    体积   分子量 *
    ×
    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
    × = ×
    浓度 (start) × 体积 (start) =
    × =
    浓度 (final) × 体积 (final)
    ×
    分子量：g/mol
    ×
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