购物车(0) 登录 En
> 产品中心

SatGreen qPCR Master Mix for HRM（2×）

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
M10201 20 µL×100 T ¥388.00 99
M10201 20 µL×500 T ¥718.00 100
查看购物车
已复制到剪贴板，前去分享吧！
效能等同Biotium EVAGREEN® DYE-BASED QPCR MASTER MIXES
本文中EVAGREEN® 为Biotium的商标及注册商标

下载说明书

实验操作小课堂

  • 问：基因组DNA模板量和纯度有什么要求？
  • 答：在20 μL反应体系中，基因组DNA模板量一般小于100 ng。模板纯度要求为OD260/OD280在1.6-2.0之间，OD260/OD230在1.5-2.0之间。
  • 问：进行HRM分析时，对样品的基因组DNA纯化方法有什么建议？
  • 答：尽可能对HRM分析的所有样品使用相同的基因组DNA纯化方法，避免由于不同提取方法中使用的洗脱缓冲液的不同组成而引入差异。
  • 问：可以用50 μL体系吗？
  • 答：HRM具有很高的灵敏性，在条件允许的情况下可使用50 μL反应体系，大的反应体系可提高反应重复性，减少实验误差对熔解曲线的负面影响。
  • 问：HRM分析中，引物设计有哪些要点？
  • 答：较短的PCR产物可提高HRM的分辨率。设计PCR引物时，尽量保持产物长度在80-300之间。对于单核苷酸多态性（SNP）分析，建议使用80-120个碱基对的PCR产物，且SNP位点尽量处在PCR产物序列中间位置。虽然较大的产物也能分析，但通常分辨率较低，因为单个碱基的变化对100个碱基对的PCR产物的熔解行为的影响比对350个碱基对的PCR产物的影响更大。
  • 问：所有检测实验都需要设置无模板对照吗？为什么？
  • 答：所有检测实验中都应包括一个无模板对照（NTC），可检测潜在的污染。
  • 问：单核苷酸多态性基因分型实验，对基因组DNA对照有什么要求？
  • 答：对于单核苷酸多态性基因分型实验，每种可能的基因型（野生型、杂合子、变异型）至少需要一个已知基因型的基因组DNA对照。
  • 问：扩增时对PCR循环次数有什么要求？
  • 答：扩增时要设定足量的PCR循环次数，使所有样本都达到PCR的平台期，以确保产生足量的扩增产物用于HRM分析。因为PCR产物量会影响PCR产物的熔融温度。
  • 问：M10201与M10302，在应用上有什么区别。
  • 答：M10201：需要HRM分析（基因突变检测（SNPs、插入缺失）、基因分型（如等位基因区分）、甲基化分析、非特异性扩增鉴别）、高灵敏度、高精度定量需求（如稀有mRNA表达、微量病原体）。M10302：常规qPCR定量，无需高分辨率熔解曲线（HRM）分析。

查看更多

发论文赢奖学金
心声有奖征集
寻找生物界最美蜘蛛网

SatGreen qPCR Master Mix for HRM（2×）
SatGreen qPCR Master Mix for HRM (2×)

2×预混Mix，按需求释放机制，安全稳定，专用qPCR/HRM分析

  • 储运条件 -20 ℃避光保存，冰袋运输。
  • 产品简介

    SatGreen qPCR Master Mix for HRM (2×)是一款适配实时荧光定量PCR与高分辨率熔解曲线（HRM）分析的预混试剂，核心组分为优化配比的2×SatGreen Master Mix for HRM，可实现qPCR扩增与HRM分析“一步式”衔接。其核心染料SatGreen基于“按需释放”机制设计，为无序列偏好性的新型dsDNA饱和染料，相较传统SYBR Green I类染料，在极低抑制PCR扩增的同时避免染料重排，搭配ROX Reference Dye校正孔间荧光误差。该产品有效解决传统试剂盒抑制性强、HRM分辨率不足的痛点，荧光信号强、背景噪音低，可清晰区分单碱基差异，广泛适用于SNP 分析、突变基因扫描、甲基化状态分析等场景，为分子诊断、遗传研究及临床科研提供高精准技术支撑。

  • 应用范围 实时荧光定量PCR，高分辨率熔解曲线分析，SNP分析，未知突变基因扫描等基因多态性与突变检测类研究等
  • 产品特点

    高灵敏度：精准探测DNA序列细微差异，能识别单碱基变化，适合HRM分析；

    稳定性优异：对PCR扩增抑制性极低，支持快速PCR流程高效进行；

    高安全性：几乎不可穿透完整的细胞膜，无致突变性，比SYBR Green I更安全；

    按需求释放：随扩增进程精准供能，支撑高浓度饱和结合；

    方便便捷：2×预混液，用于快速循环实验；

    兼容性好：与SYBR Green I光谱相似，可直接替代无需更换仪器和更改步骤；

  • 产品参数

    Ex/Em：500/530 nm (结合DNA)；

  • 产品组分

    组分

    20 μL×100 T

    20 μL×500 T

    A. 2× SatGreen Master Mix for HRM

    1 mL

    5×1 mL

    B. 10× ROX Reference Dye

    0.2 mL

    1 mL

    C. RNase-Free Water

    1×1.7 mL

    3×1.7 mL

    注：100 T按照20 μL反应体系计算；
    注：组分A包含SatGreen染料，dNTP，PCR buffer（含Tris和MgCl2），热启动Taq聚合酶。

  • 结果判读

    图1.高分辨率熔解曲线

    结果判读：umDNA、hmDNA和mDNA的高分辨率熔解曲线，结果表明hmDNA和mDNA的Tm值显著低于umDNA。

    图片引自文献《Mechanism for the substrate recognition by a eukaryotic DNA N6-adenine methyltransferase complex》

    （DOI: 10.1038/s41467-025-63738-y）
  • 问：基因组DNA模板量和纯度有什么要求？
  • 答：在20 μL反应体系中，基因组DNA模板量一般小于100 ng。模板纯度要求为OD260/OD280在1.6-2.0之间，OD260/OD230在1.5-2.0之间。
  • 问：进行HRM分析时，对样品的基因组DNA纯化方法有什么建议？
  • 答：尽可能对HRM分析的所有样品使用相同的基因组DNA纯化方法，避免由于不同提取方法中使用的洗脱缓冲液的不同组成而引入差异。
  • 问：可以用50 μL体系吗？
  • 答：HRM具有很高的灵敏性，在条件允许的情况下可使用50 μL反应体系，大的反应体系可提高反应重复性，减少实验误差对熔解曲线的负面影响。
  • 问：HRM分析中，引物设计有哪些要点？
  • 答：较短的PCR产物可提高HRM的分辨率。设计PCR引物时，尽量保持产物长度在80-300之间。对于单核苷酸多态性（SNP）分析，建议使用80-120个碱基对的PCR产物，且SNP位点尽量处在PCR产物序列中间位置。虽然较大的产物也能分析，但通常分辨率较低，因为单个碱基的变化对100个碱基对的PCR产物的熔解行为的影响比对350个碱基对的PCR产物的影响更大。
  • 问：所有检测实验都需要设置无模板对照吗？为什么？
  • 答：所有检测实验中都应包括一个无模板对照（NTC），可检测潜在的污染。
  • 问：单核苷酸多态性基因分型实验，对基因组DNA对照有什么要求？
  • 答：对于单核苷酸多态性基因分型实验，每种可能的基因型（野生型、杂合子、变异型）至少需要一个已知基因型的基因组DNA对照。
  • 问：扩增时对PCR循环次数有什么要求？
  • 答：扩增时要设定足量的PCR循环次数，使所有样本都达到PCR的平台期，以确保产生足量的扩增产物用于HRM分析。因为PCR产物量会影响PCR产物的熔融温度。
  • 问：M10201与M10302，在应用上有什么区别。
  • 答：M10201：需要HRM分析（基因突变检测（SNPs、插入缺失）、基因分型（如等位基因区分）、甲基化分析、非特异性扩增鉴别）、高灵敏度、高精度定量需求（如稀有mRNA表达、微量病原体）。M10302：常规qPCR定量，无需高分辨率熔解曲线（HRM）分析。

    • 本资料源自公开学术渠道，如需转载或引用，请联系原文作者获取授权。本页面内容仅作学术参考，不代表任何商业推荐或合作。

    摩尔浓度计算器 稀释计算器 分子量计算器
    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
    = ×
    体积   分子量 *
    ×
    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
    × = ×
    浓度 (start) × 体积 (start) =
    × =
    浓度 (final) × 体积 (final)
    ×
    分子量：g/mol
    ×
    导航 产品 工业 渠道
    收起