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Universal Premixed SYBR Green qPCR Master Mix (Chemical)

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
M10302 20 µL ×100 T ¥378.00 100
M10302 20 µL×500 T ¥799.00 100
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效能等同TAKARA TB Green® Premix Ex Taq™ II FAST qPCR
本文中TB Green® 为TAKARA的商标及注册商标;本文中Ex Taq™为TAKARA的商标及注册商标。

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实验操作小课堂

  • 问:扩增曲线不光滑。
  • 答:通常是因信号太弱,系统矫正导致,可提高模板浓度后重新实验。
  • 问:个别扩增曲线骤降。
  • 答:反应管内可能有气泡,扩增前仔细检查反应管有无气泡残留。
  • 问:Ct值出现太晚。
  • 答:a.扩增效率低:可尝试三步法程序,或重新设计引物;b.模板浓度低:减少稀释度重新实验;c.模板降解:重新制备模板,再进行实验。
  • 问:熔解曲线多峰。
  • 答:a.引物设计不优:重新设计引物;b.引物浓度太高:适当降低引物浓度;c.cDNA模板带有基因组污染:重新制备cDNA模板。
  • 问:M10201与M10302,在应用上有什么区别。
  • 答:M10201:需要HRM分析(基因突变检测(SNPs、插入缺失)、基因分型(如等位基因区分)、甲基化分析、非特异性扩增鉴别)、高灵敏度、高精度定量需求(如稀有mRNA表达、微量病原体)。M10302:常规qPCR定量,无需高分辨率熔解曲线(HRM)分析。

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Universal Premixed SYBR Green qPCR Master Mix (Chemical)
通用预混型 SYBR Green qPCR Master Mix(化学法)

一管化预混qPCR试剂,可视化色素,荧光信号增强800-1000倍,高适配

  • 储运条件 -20 ℃避光保存;冰袋运输
  • 产品简介

    Universal Premixed SYBR Green qPCR Master Mix (Chemical)是实时荧光定量PCR专用预混试剂,集成SYBR Green dye、dNTP、PCR buffer、热启动Taq聚合酶及ROX参比染料,无需复杂配制,仅加引物和模板即可启动反应。其核心原理为SYBR Green特异性结合双链DNA小沟,结合后荧光信号增强800-1000倍,实现靶基因精准定量。针对传统qPCR试剂操作繁琐、易污染、仪器兼容性差、非特异性扩增及高GC序列扩增难等痛点,本产品优化稳定性、特异性与抗抑制能力,适配多场景应用,可助力基因表达差异分析、病原体定量检测、基因拷贝数变异分析及药物靶点验证,为生命科学科研与临床辅助诊断提供稳定高效的通用qPCR解决方案。

  • 应用范围 实时定量qPCR、基因表达差异分析、基因芯片验证、病原体定量检测、靶基因的表达变化等
  • 产品特点

    极简操作:一管化Mix使用方便,仅需添加引物和模板,降低操作污染风险;

    仪器通用:预混通用参比染料,无需额外调整ROX染料,避免反复调试参数;

    灵敏度高:SYBR Green与dsDNA结合后,荧光信号能增强800-1000倍,荧光信号强;

    低抑制扩增全:针高GC含量序列顺利扩增,抗抑制能力较强,配热启动Taq聚合酶,减少非特异性扩增;

    可视化色素:预混可视化色素,追踪移液过程,减少移液错误。

  • 产品组分

    组分

    20 μL×100 T

    20 μL×500 T

    A. 2× Universal SYBR Green qPCR Master Mix

    1 mL

    5×1 mL

    B. RNase-Free Water

    1×1.7 mL

    3×1.7 mL

    注:500 T试剂盒以20 μL体系进行反应的次数。
  • 结果判读

    通过2^-ΔΔCt计算目标基因的相对表达量

    1.mRNA表达水平检测

    结果判读:WEAA对十二指肠内的抗氧化基因相关的mRNA表达水平检测。结果表明随着WEAA补充量增加,Nrf2的表达水平呈现显著的二次方上升效应(p<0.05);Keap1的表达水平呈现明显的二次方下降趋势(p<0.10);CAT的表达水平呈线性上升趋势(p<0.10),而GSH-Px基因的表达则同时呈现线性上升与二次方上升趋势(p<0.10)。此外,随着WEAA添加量的增加,HO-1的表达水平呈现显著的线性或二次方上升趋势(p<0.05)。

    注:图片引自参考文献《Effects of diet supplemented with water extracts of Artemisia annua L. on small intestinal immune and antioxidative indexes in lambs》(DOI: 10.3389/fvets.2025.1545729)
  • 问:扩增曲线不光滑。
  • 答:通常是因信号太弱,系统矫正导致,可提高模板浓度后重新实验。
  • 问:个别扩增曲线骤降。
  • 答:反应管内可能有气泡,扩增前仔细检查反应管有无气泡残留。
  • 问:Ct值出现太晚。
  • 答:a.扩增效率低:可尝试三步法程序,或重新设计引物;b.模板浓度低:减少稀释度重新实验;c.模板降解:重新制备模板,再进行实验。
  • 问:熔解曲线多峰。
  • 答:a.引物设计不优:重新设计引物;b.引物浓度太高:适当降低引物浓度;c.cDNA模板带有基因组污染:重新制备cDNA模板。
  • 问:M10201与M10302,在应用上有什么区别。
  • 答:M10201:需要HRM分析(基因突变检测(SNPs、插入缺失)、基因分型(如等位基因区分)、甲基化分析、非特异性扩增鉴别)、高灵敏度、高精度定量需求(如稀有mRNA表达、微量病原体)。M10302:常规qPCR定量,无需高分辨率熔解曲线(HRM)分析。
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    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
    = ×
    体积   分子量 *
    ×
    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
    × = ×
    浓度 (start) × 体积 (start) =
    × =
    浓度 (final) × 体积 (final)
    ×
    分子量:g/mol
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