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Mitochondrial Membrane Potential and Apoptosis Assay Kits (NucTrack™ 488 Caspase-3/7, MitoBright™ 630, EthD Gold, Hoechst 33342)
线粒体膜电位与细胞凋亡检测试剂盒
15 min一步四染、线粒体膜电位检测 健康、凋亡、坏死精准区分
单细胞分辨率：提供单个细胞的Caspase-3/7活性、线粒体膜电位、坏死及健康状态；
染料特异性高：杜绝假阳性，EthD Gold仅膜严重破损时进入，排除传统PI“瞬时渗漏”造成的坏死误判，背景干净；
适配多类检测平台：支持荧光显微镜观察（定位凋亡细胞）与流式细胞仪分析（精准定量凋亡率）；
操作简便性：一步染色即可完成多参数检测，无需复杂预处理，结果可直接通过流式散点图或显微图像量化；
高效省时：整体染色时间仅需15 min，远快于传统多步检测流程，大幅提升实验效率染色时间；
低毒高亮：MitoBright™ 630工作浓度毒性极低，可适用于长期检测；
快速检测：流式检测免洗涤。
NucTrack™ 488 Caspase-3/7 Substrate Ex/Em：500/530 nm；
EthD Gold Ex/Em：532/625 nm（结合DNA）；
MitoBright™ 630 Ex/Em：622/648 nm；
Hoechst 33342 Ex/Em：350/461 nm（结合DNA)。
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组分 |
10 T |
50 T |
100 T |
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A. NucTrack™ 488 Caspase-3/7 Substrate |
50 μL |
250 μL |
500 μL |
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B. MitoBright™ 630 |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
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C. EthD Gold |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
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D. Hoechst 33342 |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
1.定性分析（显微镜）：
图1. Mitochondrial Membrane Potential and Apoptosis Assay Kits荧光镜检拍照
正常细胞：线粒体被MitoBright™ 630染成红色，Hoechst 33342将细胞核染成蓝色；凋亡细胞：Caspase-3/7活性明显增加（绿色荧光亮度、细胞个数显著增强），EthD Gold信号明显增加（黄色荧光亮度、细胞个数明显增加），线粒体染色明显降低（红色荧光强度、细胞个数显著降低），Hoechst 33342将细胞核染成蓝色。
结果表明，K562细胞经过凋亡诱导后，线粒体膜电位下降乃至消失，Caspase-3/7活性明显增加，表明药物激活了细胞的凋亡程序，导致细胞凋亡，表明该药物促进了细胞的凋亡。
2.定量分析（流式细胞仪）：
图2. Mitochondrial Membrane Potential and Apoptosis Assay Kits流式分析
以FSC-SSC构建散点图，来确定细胞群，并记录10000个事件，以Caspase为X轴，EthD Gold为Y轴，将完整细胞群分为健康细胞（左下）、早期凋亡细胞（右下）、晚期凋亡细胞（右上）；并对单个细胞群（按照象限）进行线粒体膜电位分析，以Hoechst 33342为X轴，MitoBright™ 630为Y轴检测线粒体膜电位变化情况。
结果判读：以阳性组（2 h）为例（凋亡药物处理2 h）：图B可以区分出健康细胞（左下）、早期凋亡细胞（右下）、晚期凋亡细胞（右上），图B1表明健康细胞中有线粒体膜电位细胞的占比；图B2表明早期凋亡细胞中有线粒体膜电位细胞的占比，图B3表明晚期凋亡细胞中有线粒体膜电位细胞的占比。
结果判读1：计算三个细胞分群中有线粒体膜电位的细胞占总细胞的个数。
例：（以凋亡诱导2 h为例）
计算早期凋亡细胞有膜电位的细胞个数：10000×69.67%×30.64%=2134
结果判读2：细胞经过凋亡诱导后，随着凋亡诱导时间的增加线粒体膜电位下降，Caspase信号与EthD Gold信号增加。表明该药物促进了细胞的凋亡。
注：实际检测结果可能因检测仪器、操作条件、细胞类型等差异产生不同，本示例仅提供参考。
注：此占比并非是占总细胞数（10000个细胞）的占比，而是分析图B中三个不同分群中，有线粒体膜电位的细胞分别占各自群体的比例。
注：实际检测结果可能因检测仪器、操作条件等差异产生不同，本示例仅提供参考。
