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2×UltraPrecision™ High-Fidelity PCR Master Mix (Dye Plus)

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
M10703 50 μL×10 T ¥210.00 100
M10703 50 μL×200 T ¥1600.00 100
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效能等同NEBNext® Q5® Hot Start HiFi PCR Master Mix（M0543）、TOYOBO KOD One™ PCR Master Mix -Blue-（KMM-101）

本文中NEBNext®、Q5®均为New England Biolabs, Inc.的商标及注册商标。 

本文中KODOne™为 Toyobo Co., Ltd.的商标及注册商标。

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实验操作小课堂

  • 问：无产物或产物量少？
  • 答：a. 重复实验排除加样错误；
    b. 优化引物设计；
    c. 设置退火温度梯度（55-65 °C）；
    d. 使用高纯度模板并适当增加用量；
    e. 延长延伸时间；
    f. 增加循环数至35-40；
    g. 提高Mg²⁺浓度至3-4 mM。
  • 问：出现非特异性扩增或弥散条带该如何解决？
  • 答：a. 设置退火温度梯度优化；
    b. 降低引物终浓度至0.2 μM；
    c. 优化引物设计；
    d. 缩短延伸时间；
    e. 减少循环数至25-30；
    f. 使用高纯度模板并减少用量。

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2×UltraPrecision™ High-Fidelity PCR Master Mix (Dye Plus)
2×UltraPrecision™高保真 PCR 预混液（含染料）

160倍超高保真PCR预混液，高效适配复杂模板，扩增快速便捷

  • 储运条件 -20 ℃避光保存，避免反复冻融；冰袋运输
  • 产品简介 2×UltraPrecision™ High-Fidelity PCR Master Mix (Dye Plus)是专为高保真 PCR 研发的即用型预混液，依托基因改造超高保真DNA聚合酶，凭借强效3'→5'外切酶活性，将保真性提升至普通Taq酶的160倍以上，精准降低扩增错误率。产品搭载优化缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、PCR增强剂与稳定剂，2×高浓度配比，无需繁琐配制，可直接电泳。相比传统PCR，它高效解决低丰度、高GC/AT复杂模板扩增难题，显著抑制非特异性扩增与引物降解，兼顾高保真与高效性。广泛适配分子克隆、测序、定点突变、长片段扩增等场景，为分子生物学精准实验提供稳定可靠的解决方案，大幅提升结果可信度与实验效率。
  • 应用范围 超高保真PCR快速扩增、平端克隆、无缝克隆、基因定点突变；低丰度模板、复杂模板（富含GC/AT）扩增；高通量测序文库构建；长片段DNA扩增
  • 产品特点

    超高保真：保真性为普通Taq DNA聚合酶的160倍以上；

    特异性强：热启动聚合酶提高反应的特异性，扩增目的条带单一；

    灵敏度高：可扩增低至0.5 pg模板；

    高效快速：延伸速度1-30 sec/kb，大幅缩短PCR反应时间；

    长片段扩增：质粒和基因组DNA可扩增≥20kb的片段；

    强耐受性：对PCR抑制剂耐受，可稳健扩增低丰度、复杂模板（如富含GC/AT）及长片段；

    便捷省时：含电泳指示剂，扩增后可直接点样电泳。

  • 产品组分

    组分

    50 μL×10 T

    50 μL×200 T

    A. 2×UltraPrecision™ High-Fidelity PCR Master Mix(Dye Plus)

    250 μL

    5×1 mL

    B. RNase-Free Water

    1.7 mL

    3×1.7 mL

    注：200 T为试剂盒进行50 μL反应体系的总数。
  • 结果判读

    图1.PL产品与进口Ther*竞品PCR产物对比图

     

    图2. PL产品与国产竞品Vazy*PCR产物对比图

    结果判读：HEK 293T RNA反转为cDNA，模板稀释5倍后，每25 μL PCR体系加1 μL，PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，片段大小、亮度符合预期，与竞品相比，我司产品结果条带更亮，扩增效率优异。扩增条带基因名称及大小如下：PDHA1(1.1 kb)、PGK1(1.2kb)、ADAR-F2(1.9 kb)、ITGB1(2.4 kb)、HERC1-F1(5.8 kb)、ADAR-UTR(5.7 kb)、TET2(5.9 kb)、TET1(6.2 kb)、mTOR(7 kb)、SMG1(10.1 kb）、HERC1-F2(10.9 kb)、HERC1-FL(14.5 kb)。

  • 问：无产物或产物量少？
  • 答：a. 重复实验排除加样错误；
    b. 优化引物设计；
    c. 设置退火温度梯度（55-65 °C）；
    d. 使用高纯度模板并适当增加用量；
    e. 延长延伸时间；
    f. 增加循环数至35-40；
    g. 提高Mg²⁺浓度至3-4 mM。
  • 问：出现非特异性扩增或弥散条带该如何解决？
  • 答：a. 设置退火温度梯度优化；
    b. 降低引物终浓度至0.2 μM；
    c. 优化引物设计；
    d. 缩短延伸时间；
    e. 减少循环数至25-30；
    f. 使用高纯度模板并减少用量。

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    摩尔浓度计算器 稀释计算器 分子量计算器
    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
    = ×
    体积   分子量 *
    ×
    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
    × = ×
    浓度 (start) × 体积 (start) =
    × =
    浓度 (final) × 体积 (final)
    ×
    分子量：g/mol
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