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Ready-to-use DRAQ5 Live Cell DNA Dye (5 mM)

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
C22201 20 µL ¥850.00 100
C22201 50 µL ¥1650.00 100
C22201 200 µL ¥3750.00 100
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效能等同于AAT ReadiUse™ DRAQ5 Staining Solution *5 mM in Water*(17558)

本文中DRAQ5是Biostatus Limited的商标及注册商标; 

本文中ReadiUse™是AAT Bioquest的商标及注册商标。

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实验操作小课堂

  • 问:DRAQ5储液是否含DMSO?
  • 答:该产品为水溶液形式,不含DMSO。
  • 问:用DRAQ5对小鼠细胞进行2-3 h的活细胞成像。在对DRAQ5染色的细胞成像多久之后,在细胞毒性产生并使细胞死亡之前可以停止成像?
  • 答:使用说明中有相应描述“DRAQ5染色在37 °C下加速,孵育时间(5-30 min)可能会缩短”,但这应该通过滴定和每种细胞类型进行分别测定。在未添加任何激动剂/拮抗剂之前,可以在1 μM的检测持续时间(通常为0.5-3 h)将DRAQ5添加到检测培养基中。DRAQ5染色发生得非常快,因此建议在分析前将DRAQ5添加到活细胞中。细胞的孵育时间不应超过3 h,但可能会因细胞系而异。
  • 问:使用DRAQ5对上皮癌细胞的细胞核进行染色,发现荧光随着时间的推移变得越来越强。这种影响在激光功率较高和受热时发生得更强烈。这可能是什么原因呢?随着时间的推移,越来越多的染料与细胞核的DNA结合吗?它是否仅在与核DNA反应时发出荧光?是否知道染料在细胞凋亡过程中的行为。当染料变少时,染料能否与细胞核的DNA结合得一样好?
  • 答:可以确认DRAQ5染色在较高温度下增强,因此可能需要调整孵育期。孵育期越长,我们预期的信号就越多,直到DNA饱和。如果DRAQ5随后被清洗,我们预计染色会随着时间的推移而缓慢下降。
    除非DRAQ5与dsDNA结合,否则它几乎不会发出荧光。只有当它嵌入dsDNA中时,它才会产生强烈的荧光信号。DRAQ5染色在细胞凋亡中不受影响,因为DRAQ5对dsDNA的亲和力在活细胞或死细胞中没有差异。随着细胞凋亡中dsDNA的数量发生变化,DRAQ5信号的强度也会随着dsDNA的变化而变化。
  • 问:正在进行18 h的细胞成像实验。在12 h后将DRAQ5培养基更换为不含DRAQ5的培养基时,染色强度会下降。1)是 否需要始终将DRAQ5保存在培养基中,即使可能会有毒性影响?2)如果从培养基中去除DRAQ5,染色会持续多长时间?
  • 答:a.我们预计细胞染色在培养基更换后会减少。尽管DRAQ5对dsDNA具有高亲和力,但仍存在平衡,去除培养基中的低残留浓度会破坏这种平衡。
    b.我们认为染色在去除后可能会持续1-2 h,但这可能取决于细胞暴露于先前使用的浓度。因为如果有任何毒性证据,人们会希望保持较低的浓度(可能是0.5-1 μM)。可以肯定的是,DRAQ5是否会产生毒性影响完全取决于细胞系和状态。根据文献报道可以合理地预测,未处于增殖状态的细胞对任何细胞通透性DNA嵌入探针的敏感性较低。例如,它可能更有可能适用于巨噬细胞或人脐静脉内皮细胞等终末分化细胞类型,其中它和密切相关的CyTRAK Orange已在长期实验中得到证明。如果使用的细胞系在使用时没有毒性表现,那么我们可以在DRAQ5存在的条件下持续进行18 h的实验。
  • 问:在使用DRAQ5和DRAQ7的时候,这两者有什么区别,该如何选择?
  • 答:对活细胞进行 DNA 分析、长期监测细胞状态或进行组织深层成像时选DRAQ5;评估细胞活力、检测凋亡或区分样本中的死活细胞群体时选DRAQ7。两者的区别如下:

    对比

    DRAQ5

    DRAQ7

    细胞膜渗透性

    可透过

    不可透过

    染色对象

    活细胞和固定细胞的所有细胞核

    仅死亡细胞、凋亡细胞或透化细胞的细胞核

    结合方式

    与 DNA 化学计量结合,荧光强度反映 DNA 含量

    特异性结合双链 DNA,染色快速

    适用场景

    活细胞 DNA 含量分析、细胞周期研究、长期活细胞成像实验、深层组织/肿瘤组织成像

    细胞活力评估、细胞凋亡检测、药物/化合物体外毒性测试、区分死活细胞的流式细胞术实验

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Ready-to-use DRAQ5 Live Cell DNA Dye (5 mM)
Ready-to-use DRAQ5 活细胞 DNA 染料 (5 mM)

远红外荧光探针:可对活 / 固定细胞进行核染色,最快5 min精准活细胞成像,适配多色成像实验

  • 储运条件 4 ℃,避光;冰袋运输。
  • 产品简介

    Draq5 是远红外亲脂性膜透性 DNA 染料,可用于活细胞或固定细胞的细胞核染色。其核心优势显著:激发波段宽泛(488-647 nm)、发射位于远红外区,可完美替换 Hoechst 及 DAPI,弥补其紫外激发限制,适配多通路检测;不干扰 GFP 荧光蛋白,可复染核测定该类细胞增殖情况。用于细胞周期 DNA 含量分析时,因特异性结合 DNA 不结合 RNA,无需 RNase 处理,且膜透性无需破膜、无需洗涤步骤,为实验省时省力。广泛应用于多通路联合检测、GFP 标记细胞增殖测定及细胞周期分析,是便捷高效的核染色工具。

  • 应用范围 活细胞成像,活细胞实时核标记与动态观察,细胞周期分析,活细胞的DNA标记,染色质超微结构研究等
  • 产品特点

    免破膜/洗涤:活细胞直接染色,无需破膜处理,染色后无需洗涤;

    极速染色:室温最快5 min快速染色,大幅缩短实验时间;

    方便使用:以易用的5 mM液体形式提供,按需稀释后即用;

    适合多色搭配:广谱的激发波段及远红外发射波段,适合多色搭配;

    细胞成像:DRAQ5为膜透性细胞核染料,可用于活细胞成像以及核酸含量测定。

  • 产品参数

    Ex/Em601/699 nm;

    分子式:C22H28N2O4

    分子量:412.21;

    光谱图:


  • 产品组分

    组分

    40 T

    100 T

    400 T

    Ready-to-use DRAQ5 Live Cell DNA Dye(5 mM in Water)

    20 μL

    50 μL

    200 μL

    注:规格是以5×10⁴ cells/well为例,染色工作液浓度20 μM计算。

  • 结果判读

    定性分析(显微镜):

     

    1. DRAQ5染料用于活细胞DNA染色的荧光显微成像

    正常细胞核染色细胞核区呈现均匀红色荧光,核区边界清晰;

    背景干扰:若细胞外或背景荧光强,提示洗涤不充分或染料浓度过高

    注:图片引自参考文献《DNA labeling in living cells》(doi: 10.1002/cyto.a.20172)
  • 问:DRAQ5储液是否含DMSO?
  • 答:该产品为水溶液形式,不含DMSO。
  • 问:用DRAQ5对小鼠细胞进行2-3 h的活细胞成像。在对DRAQ5染色的细胞成像多久之后,在细胞毒性产生并使细胞死亡之前可以停止成像?
  • 答:使用说明中有相应描述“DRAQ5染色在37 °C下加速,孵育时间(5-30 min)可能会缩短”,但这应该通过滴定和每种细胞类型进行分别测定。在未添加任何激动剂/拮抗剂之前,可以在1 μM的检测持续时间(通常为0.5-3 h)将DRAQ5添加到检测培养基中。DRAQ5染色发生得非常快,因此建议在分析前将DRAQ5添加到活细胞中。细胞的孵育时间不应超过3 h,但可能会因细胞系而异。
  • 问:使用DRAQ5对上皮癌细胞的细胞核进行染色,发现荧光随着时间的推移变得越来越强。这种影响在激光功率较高和受热时发生得更强烈。这可能是什么原因呢?随着时间的推移,越来越多的染料与细胞核的DNA结合吗?它是否仅在与核DNA反应时发出荧光?是否知道染料在细胞凋亡过程中的行为。当染料变少时,染料能否与细胞核的DNA结合得一样好?
  • 答:可以确认DRAQ5染色在较高温度下增强,因此可能需要调整孵育期。孵育期越长,我们预期的信号就越多,直到DNA饱和。如果DRAQ5随后被清洗,我们预计染色会随着时间的推移而缓慢下降。
    除非DRAQ5与dsDNA结合,否则它几乎不会发出荧光。只有当它嵌入dsDNA中时,它才会产生强烈的荧光信号。DRAQ5染色在细胞凋亡中不受影响,因为DRAQ5对dsDNA的亲和力在活细胞或死细胞中没有差异。随着细胞凋亡中dsDNA的数量发生变化,DRAQ5信号的强度也会随着dsDNA的变化而变化。
  • 问:正在进行18 h的细胞成像实验。在12 h后将DRAQ5培养基更换为不含DRAQ5的培养基时,染色强度会下降。1)是 否需要始终将DRAQ5保存在培养基中,即使可能会有毒性影响?2)如果从培养基中去除DRAQ5,染色会持续多长时间?
  • 答:a.我们预计细胞染色在培养基更换后会减少。尽管DRAQ5对dsDNA具有高亲和力,但仍存在平衡,去除培养基中的低残留浓度会破坏这种平衡。
    b.我们认为染色在去除后可能会持续1-2 h,但这可能取决于细胞暴露于先前使用的浓度。因为如果有任何毒性证据,人们会希望保持较低的浓度(可能是0.5-1 μM)。可以肯定的是,DRAQ5是否会产生毒性影响完全取决于细胞系和状态。根据文献报道可以合理地预测,未处于增殖状态的细胞对任何细胞通透性DNA嵌入探针的敏感性较低。例如,它可能更有可能适用于巨噬细胞或人脐静脉内皮细胞等终末分化细胞类型,其中它和密切相关的CyTRAK Orange已在长期实验中得到证明。如果使用的细胞系在使用时没有毒性表现,那么我们可以在DRAQ5存在的条件下持续进行18 h的实验。
  • 问:在使用DRAQ5和DRAQ7的时候,这两者有什么区别,该如何选择?
  • 答:对活细胞进行 DNA 分析、长期监测细胞状态或进行组织深层成像时选DRAQ5;评估细胞活力、检测凋亡或区分样本中的死活细胞群体时选DRAQ7。两者的区别如下:

    对比

    DRAQ5

    DRAQ7

    细胞膜渗透性

    可透过

    不可透过

    染色对象

    活细胞和固定细胞的所有细胞核

    仅死亡细胞、凋亡细胞或透化细胞的细胞核

    结合方式

    与 DNA 化学计量结合,荧光强度反映 DNA 含量

    特异性结合双链 DNA,染色快速

    适用场景

    活细胞 DNA 含量分析、细胞周期研究、长期活细胞成像实验、深层组织/肿瘤组织成像

    细胞活力评估、细胞凋亡检测、药物/化合物体外毒性测试、区分死活细胞的流式细胞术实验

  • 本资料源自公开学术渠道,如需转载或引用,请联系原文作者获取授权。本页面内容仅作学术参考,不代表任何商业推荐或合作。

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    货号 规格 目录价 库存
    C22202 50 µL 320.00元 1000
    C22202 0.5 mL 1850.00元 100
    C22202 1 mL 2899.00元 100
    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
    = ×
    体积   分子量 *
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    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
    × = ×
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    × =
    浓度 (final) × 体积 (final)
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    分子量:g/mol
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