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Viability/Cytotoxicity Plus Assay Kits for Animal Live & Dead Cells(Calcein AM, EthD Gold)

产品货号 产品规格 目录价 库存 数量
C20703 100 T ¥278.00 100
C20703 300 T ¥558.00 100
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效能等同于Biotium Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live & Dead 30002。

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实验操作小课堂

  • 问：为什么Calcein AM的荧光信号容易淬灭？如何缓解？
  • 答：Calcein AM的荧光基团对光照敏感，易发生光淬灭；可以在实验中的缓解方法有：
    a. 实验全程严格避光操作，染色后尽快完成检测；
    b. 荧光显微镜拍照时先拍摄Hoechst 33342通道，再拍摄Calcein AM通道，减少其曝光时间；
    c. 避免使用含甘油的抗淬灭剂，甘油的黏性与透光性会影响快速检测。
  • 问：使用贴壁细胞进行流式检测时为什么要保留培养细胞的培养基？
  • 答：药物处理后的细胞已经存在凋亡或坏死细胞，这些细胞的贴壁能力逐渐降低，会游离在培养基中，染色检测时需要将这部分细胞考虑进去，否则检测结果中可能导致细胞活力检测结果偏高、坏死率偏低，对药物效果或者细胞处理效果的评价会产生错误判断。
  • 问：使用CCCP诱导贴壁细胞凋亡时，细胞易脱落如何解决？
  • 答：CCCP易导致贴壁细胞凋亡后脱落，造成检测结果偏低；可替换诱导剂为10%无水乙醇，其诱导的细胞凋亡更温和，贴壁细胞脱落现象显著缓解，且不影响三种染料的染色效果。
  • 问：试剂盒有将EthD Gold替换为PI的染料配置，使用PI染料的试剂盒使用时需注意什么？
  • 答：PI为常用的死细胞染色染料，但其可与RNA结合，染色特异性低于EthD Gold；使用PI染色时需注意：
    a. PI的使用量为EthD Gold的3倍（如显微镜检测时1 mL工作液加3 μL PI）；
    b. PI的激发/发射波长为527/624nm，仍使用流式PE通道与荧光显微镜Cy3滤片检测。
  • 问：我司有三款同系列试剂盒该如何进行选择？
  • 答：三款试剂盒的选择可参考下表：

    产品货号

    核心探针组合

    定位

    核心优势

    适用场景

    C20703

    Calcein AM + EthD Gold

    基础升级款（双染）

    EthD Gold替代PI，假阳性低、特异性强，高性价比，操作便捷

    常规死活检测、药物毒性初筛、传统双染方案升级

    C20704

    Calcein AM + EthD Gold + Hoechst 33342

    旗舰科研款（三染）

    EthD Gold加持，新增核染内参，定量精准、抗干扰强

    高精度活力检测、科研级毒性评估、高端流式分析

    C20705

    Calcein AM + PI + Hoechst 33342

    经典兼容款（三染）

    保留PI通用性，新增核染提升定量，适配传统实验流程

    常规实验、教学实验、批量初筛、延续PI检测习惯

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Viability/Cytotoxicity Plus Assay Kits for Animal Live & Dead Cells(Calcein AM, EthD Gold)
动物活死细胞活性/细胞毒性检测试剂盒(Calcein AM，EthD Gold)

动物细胞死活检测试剂盒、EthD Gold代替PI、精准死活检测，最快10 min一步染色

  • 储运条件 -20 ℃避光保存，冰袋运输
  • 产品简介 专为多场景通用检测设计的动物细胞活力/毒性检测试剂盒，核心依托Calcein AM与EthD-Gold的光谱差异及细胞穿透特性实现精准检测：Calcein AM穿透完整细胞膜，被活细胞内酯酶水解后呈特异性绿色荧光；EthD-Gold仅能进入膜破损的细胞，与DNA结合后发出明亮红色荧光，其荧光亮度较传统PI高50%，且仅结合DNA可避免RNA干扰，结果区分直观。试剂盒采用预分装组分形式，按比例混合即可完成染色，操作步骤极简，最快10 min内可完成细胞活力定性检测。该产品聚焦基础活死细胞检测场景，无需自行调配染料比例，是快速开展细胞活力定性观察的高效基础工具。
  • 应用范围 活细胞、凋亡细胞、坏死细胞的实时动态观察与区分，细胞的活力/毒性快速检测，药物研发，细胞毒性机制研究，常规细胞培养质控，细胞库验收，复苏活力检测，高通量药物初筛；
  • 产品特点

    三色荧光无串扰：Calcein AM（绿色）、EthD Gold（红色）、Hoechst 33342（蓝色）发射波段差异显著，无信号重叠，规避细胞自发荧光干扰，检测结果误判率低；

    染色高效稳定：室温避光孵育仅需10 min，EthD Gold与Hoechst 33342荧光抗淬灭能力强，信号持久清晰；

    坏死标记更特异：采用EthD Gold染料，荧光亮度较传统PI高50%，不标记晚期凋亡细胞、有效避免假阳性，坏死识别更准确；

    细胞分型更严谨可靠：新增Hoechst 33342全细胞核染色，提供稳定内参，可精准校正总细胞数，量化各类细胞占比；

    多平台兼容通用：适配荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪，支持成像观察与定量分析，兼容2D/3D细胞培养体系；

  • 产品参数

    Calcein AM Ex/Em：494/517 nm；

    EthD Gold Ex/Em：532/625 nm(with DNA)；

    PI Ex/Em：527/624 nm(with DNA)；

    Hoechst 33342 Ex/Em：350/461 nm(with DNA)。

  • 产品组分

    Viability/Cytotoxicity Plus Assay Kits for Animal Live & Dead Cells(Calcein AM, EthD Gold)(C20703)

    组分

    100 T

    300 T

    A. Calcein AM

    10 μL

    30 μL

    B. EthD Gold

    10 μL

    30 μL

    注：试剂盒使用次数为进行96孔板荧光显微镜检测时可检测的微孔总数。 

    注：试剂盒C20705中操作时染料PI使用量为EthD Gold的3倍进行染色。

  • 结果判读

    1. 定性分析（显微镜）：

    图1.使用Calcein AM, EthD Gold, Hoechst 33342进行人iPSC衍生神经前体细胞(NPC)的细胞活力与细胞毒性检测纳米气泡对细胞的影响

    结果判读：

    细胞类型

    Calcein AM绿色荧光

    Hoechst 33342蓝色荧光

    EthD Gold红色荧光

    结果说明

    活细胞

    强荧光

    蓝光荧光均匀分布

    无荧光

    膜完整，核完整，边界清晰

    死细胞

    无荧光

    强蓝色荧光明显聚集

    强荧光

    膜破裂，核肿胀，弥散絮状


    注：图片引自文献《Stable charged nanobubbles with distinct polarities in culture media differentially affect the viability of human iPSC-derived neurons》（doi: 10.1038/s41598-026-41156-4）

    注：实际检测结果可能因检测仪器、操作条件、细胞类型等差异产生不同，本示例仅提供参考。

  • 问：为什么Calcein AM的荧光信号容易淬灭？如何缓解？
  • 答：Calcein AM的荧光基团对光照敏感，易发生光淬灭；可以在实验中的缓解方法有：
    a. 实验全程严格避光操作，染色后尽快完成检测；
    b. 荧光显微镜拍照时先拍摄Hoechst 33342通道，再拍摄Calcein AM通道，减少其曝光时间；
    c. 避免使用含甘油的抗淬灭剂，甘油的黏性与透光性会影响快速检测。
  • 问：使用贴壁细胞进行流式检测时为什么要保留培养细胞的培养基？
  • 答：药物处理后的细胞已经存在凋亡或坏死细胞，这些细胞的贴壁能力逐渐降低，会游离在培养基中，染色检测时需要将这部分细胞考虑进去，否则检测结果中可能导致细胞活力检测结果偏高、坏死率偏低，对药物效果或者细胞处理效果的评价会产生错误判断。
  • 问：使用CCCP诱导贴壁细胞凋亡时，细胞易脱落如何解决？
  • 答：CCCP易导致贴壁细胞凋亡后脱落，造成检测结果偏低；可替换诱导剂为10%无水乙醇，其诱导的细胞凋亡更温和，贴壁细胞脱落现象显著缓解，且不影响三种染料的染色效果。
  • 问：试剂盒有将EthD Gold替换为PI的染料配置，使用PI染料的试剂盒使用时需注意什么？
  • 答：PI为常用的死细胞染色染料，但其可与RNA结合，染色特异性低于EthD Gold；使用PI染色时需注意：
    a. PI的使用量为EthD Gold的3倍（如显微镜检测时1 mL工作液加3 μL PI）；
    b. PI的激发/发射波长为527/624nm，仍使用流式PE通道与荧光显微镜Cy3滤片检测。
  • 问：我司有三款同系列试剂盒该如何进行选择？
  • 答：三款试剂盒的选择可参考下表：

    产品货号

    核心探针组合

    定位

    核心优势

    适用场景

    C20703

    Calcein AM + EthD Gold

    基础升级款（双染）

    EthD Gold替代PI，假阳性低、特异性强，高性价比，操作便捷

    常规死活检测、药物毒性初筛、传统双染方案升级

    C20704

    Calcein AM + EthD Gold + Hoechst 33342

    旗舰科研款（三染）

    EthD Gold加持，新增核染内参，定量精准、抗干扰强

    高精度活力检测、科研级毒性评估、高端流式分析

    C20705

    Calcein AM + PI + Hoechst 33342

    经典兼容款（三染）

    保留PI通用性，新增核染提升定量，适配传统实验流程

    常规实验、教学实验、批量初筛、延续PI检测习惯

    • 本资料源自公开学术渠道，如需转载或引用，请联系原文作者获取授权。本页面内容仅作学术参考，不代表任何商业推荐或合作。

    5-CFDA, AM
    最快15 min标记，低渗漏低毒，信号稳定，检测细胞活力
    货号 规格 目录价 库存
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    0.4%即用型台盼蓝，适配显微镜镜检，3 min区分死活细胞
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    C20711 5 mL 99.00元 99
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    C20710 5 mL 89.00元 100
    C20710 25 mL 188.00元 100
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    货号 规格 目录价 库存
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    C20707 500 T 329.00元 100
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    替代台盼蓝/AO/EB，精准区分死活细胞双染试剂，适配全品牌计数仪（高荧光）
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    C20709 100 T 88.00元 100
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    AO/PI Double Staining Kit (Set B, For Cell Counter)
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    C20708 100 T 88.00元 100
    C20708 500 T 329.00元 100
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    Viability/Cytotoxicity Plus Assay Kits for Animal Live & Dead Cells(Calcein AM, EthD Gold, Hoechst 33342)
    最快10 min一步染色，三色无串扰，细胞活性/毒性增强版，精准死活检测
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    C20704 100 T 326.00元 100
    C20704 300 T 668.00元 100
    AO/PI Cell Viability Detection Kit (For Fluorescence Microscopy)
    荧光显微镜适配AO/PI，免配液，最快5 min染色，精准检测细胞活性
    货号 规格 目录价 库存
    C20706 50 T 99.00元 100
    C20706 250 T 339.00元 100
    摩尔浓度计算器 稀释计算器 分子量计算器
    质量   浓度   体积   分子量 *
    = × ×
    质量   浓度
    = ×
    体积   分子量 *
    ×
    浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
    × = ×
    浓度 (start) × 体积 (start) =
    × =
    浓度 (final) × 体积 (final)
    ×
    分子量：g/mol
    ×
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