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Propidium Monoazide Bromide (PMA)
叠氮溴化丙锭（Propidium Monoazide Bromide，PMA）
10 min特异永久修饰死菌DNA，qPCR兼容，水溶性佳，无毒无漏检，多样本适用
精准活死区分，不扰活菌：仅结合死菌DNA，不扰活菌代谢（可后续培养），定量准确率提升30%+，久经验证；
PCR抑制效能标杆：死菌DNA去除率优于传统EMA，高浓度死菌样品定量偏差＜5%，杜绝假阳 / 假阴性；
厚壁微生物适配性强：成熟穿透技术，轻松解决革兰氏阳性菌、真菌等难破壁微生物活死区分痛点；
10 min快速修饰：无需复杂前处理，四步标准化流程，10 min即可完成死菌DNA特异性修饰，适配批量检测；
多平台兼容，信号稳定：适配PCR等传统及主流平台，荧光信号稳定，实验重复性高；
水溶性佳，安全便捷：无需有机溶剂辅助溶解，操作简便且无细胞毒性干扰，降低实验风险；
应用场景全面覆盖：覆盖细菌、酵母、真菌、寄生虫等微生物，适配粪便、土壤、食品、临床感染样本等复杂样本。
外观：可溶于水或DMSO的红色固体；
Ex：464 nm(before photolysis)；
Ex/Em：510/610 nm(following photolysis and reaction with DNA/RNA)；
分子式：C27H32Cl2N6；
分子量：511.5；
|
组分 |
200 T |
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A. Propidium Monoazide Bromide (PMA) |
1 mg |
以活细菌和死细菌作为对照，分析计算样本中的活细胞数量。
1. 计算死、活细菌对照dCt
(1) qPCR实验结束后，用仪器自带软件计算每个样本的Ct值。
(2) 通过计算每个对照细菌的dCt来判断PMA是否成功抑制了死细菌DNA的扩增，计算如下：
dCt活=Ct（活, PMA 处理）－Ct（活, PMA 未处理）
dCt死=Ct（死, PMA 处理）－Ct（死, PMA 未处理）
(3) 活细菌dCt预期值接近0±1，这意味着PMA不会干扰活细胞DNA的扩增。
(4) 死细菌的dCt预期值大于4（dCt为4时，代表死细菌DNA减少约16倍，即去除了94%；dCt为8时，减少约250倍，即去除了99.6%）。
2. 计算活细菌占比
当死、活细菌对照结果无异常，即可开展样本中活细菌占比的计算。
(1) 样本dCt值的计算：
dCt样本=Ct（样本, PMA 处理）－Ct（样本, PMA 未处理）
(2) dCt值转换为活细菌比例：
PMA抑制倍数=2（样本dCt）
活细菌%=100 / PMA抑制倍数
3. 活细菌绝对数量的计算
若要计算样本中活细菌的绝对数量，需用已知数量的目标菌基因组DNA绘制标准曲线。建议将几组基因组浓度稀释至 qPCR分析体系的有效范围内。
(1) 制作标准曲线，细胞数为横坐标，Ct值为纵坐标。
(2) 实验样本拷贝数的计算：
Ct=斜率*细胞数+y轴截距(y=mx+b)
细菌数样本=（Ct－y轴截距）/斜率
示例：下图，活/死大肠杆菌用25 μM PMA孵育后光解处理，然后提取gDNA，采用uidA引物进行扩增。
注：纯化过程中活细菌DNA未损失。
注：因不同仪器不同菌群检测结果会有差异，此结果仅供参考。
| Ready-to-use PMA (20 mM in Water) | |||
| 10 min特异永久修饰死菌DNA，qPCR兼容，即开即用，无毒无漏检 | |||
| 货号 | 规格 | 目录价 | 库存 |
| M10508 | 100 µL | 680.00元 | 100 |
| Ready-to-use SYTOLive™ 9 Nucleie Acid Stains(5 mM) | |||
| 绿色核酸染料，荧光增强＞50倍，可搭配PI快速微生物死活鉴别 | |||
| 货号 | 规格 | 目录价 | 库存 |
| C22217 | 100 µL | 999.00元 | 100 |
| Ethidium Monoazide Bromide (EMA) | |||
| 10 min光激活修饰，特异性区分活死菌，可用DNA功能研究 | |||
| 货号 | 规格 | 目录价 | 库存 |
| M10506 | 5 mg | 799.00元 | 100 |
